Jednak gdy widma emisyjne nakładają się, można wykryć fluorescencję więcej niż jednego fluorochromu. Aby skorygować to nakładanie się widm, stosuje się proces kompensacji fluorescencji. Gwarantuje to, że fluorescencja wykryta w konkretnym detektorze pochodzi z mierzonego fluorochromu.
Dlaczego potrzebujemy kompensacji w cytometrii przepływowej?
Kompensacja jest wymagana w przypadku eksperymentu cytometrii przepływowej ze względu na fizykę fluorescencji. Fluorochrom jest wzbudzony i emituje foton o różnych długościach fal. Niektóre z tych fotonów przedostają się do drugiego detektora, powodując, że pojedyncze zabarwione próbki wydają się podwójnie dodatnie.
Jaki jest główny cel korzystania z komory kompensacyjnej?
Głównym celem jest umożliwienie pomiaru rzeczywistej fluorescencji w głównym kanale zanieczyszczonym przez wyciek z sąsiednich fluoroforów. Dlatego kompensacja koryguje „przekroczenie” fluorescencji pomiędzy fluoroforami. Jednak nie jest doskonały i nie może naprawić wszystkich niepożądanych efektów.
Co to jest macierz wynagrodzeń?
Macierz kompensacji jest obliczana przy użyciu jednokolorowych plików kontrolnych fluorescencyjnych, które są gromadzone w ImageStream lub FlowSight z zebranymi wszystkimi kanałami i przy braku oświetlenia jasnego pola lub SSC.
Co to jest kompensacja widmowa?
Korzystanie z widmakompensacja oznacza, że sygnał z detektorów innych niż podstawowe jest nadal używany do wzmocnienia prawdziwego sygnału znaczników tam, gdzie to możliwe. Próbki kontroli pierwotnej są używane do nazewnictwa parametrów. … Próbki używane do detektorów pierwotnych również pomagają nazwać te parametry po kompensacji widmowej.
