W ostatnich latach firma Coriell wykorzystywała całą inaktywowaną termicznie surowicę do swoich kultur komórkowych, aby dezaktywować białko dopełniacza znajdujące się w surowicy noworodków cielęcych. Odkąd przeszliśmy na płodową surowicę bydlęcą, stwierdziliśmy, że inaktywacja cieplna nie jest konieczna dla większości linii komórkowych.
Jak długo podgrzewasz dezaktywację FBS?
Poniższy protokół jest sugerowany dla inaktywacji termicznej płodowej surowicy bydlęcej (FBS). FBS jest ogrzewany do 56±2°C przez 30±2 minuty w łaźni wodnej z mieszaniem. Inaktywacja cieplna (HI) – proces, w którym FBS jest utrzymywany w temperaturze 56±2°C przez 30±2 minuty.
Dlaczego przed użyciem FBS konieczna jest dezaktywacja termiczna?
Powszechną obróbką FBS jest inaktywacja termiczna, podczas której FBS jest podgrzewany do 56°C przez 30 minut w łaźni wodnej z od czasu do czasu wstrząsaniem. Celem jest dezaktywacja wszystkich składników układu dopełniacza obecnych w FBS [24] oraz innych potencjalnych nieznanych inhibitorów wzrostu komórek.
Dlaczego musisz podgrzewać dezaktywację serum?
Celem inaktywacji termicznej jest zniszczenie aktywności dopełniacza w surowicy bez wpływu na właściwości promujące wzrost produktu. Usunięcie aktywności dopełniacza z surowicy nie jest wymagane w przypadku większości hodowli komórkowych, ale może być konieczne w przypadku hodowli wrażliwych na aktywność dopełniacza.
Jak przechowywać FBS nieaktywny termicznie?
Chroń rozmrożony FBS i inne surowice za pomocą bezpiecznego chłodzenia imagazynowanie. Natychmiast użyj rozmrożonej surowicy. Płynne FBS i inne serum można przechowywać w lodówce (2 do 8 °C) do czterech tygodni.