Luciferin jest powszechnym reporterem bioluminescencyjnym używanym do obrazowania in ekspresji lucyferazy w warunkach in vitro. Ten rozpuszczalny w wodzie substrat dla enzymu lucyferazy ze świetlika (zwykle z Photinus pyralis) wykorzystuje ATP i Mg2+ jako kofaktory do emitowania charakterystycznej żółto-zielonej emisji w obecności tlenu.
Co robi D-Lucyferyna?
Luciferin jest powszechnym reporterem bioluminescencyjnym używanym do obrazowania in vivo ekspresji lucyferazy . Ten rozpuszczalny w wodzie substrat dla enzymu lucyferazy świetlika wykorzystuje ATP i Mg2+ jako kofaktory emitujące charakterystyczną żółto-zieloną emisję w obecności tlenu, który przechodzi w czerwone światło in vivo w 37°C.
Co to jest potas D-lucyferyny?
Szczegóły. Sól potasowa D-lucyferyny jest użytecznym substratem dla enzymu lucyferazy świetlika. Po utlenieniu przez enzym lucyferazę wytwarza bioluminescencję. D-lucyferyna może być wykorzystana do oznaczenia ekspresji genu lucyferazy połączonego z promotorem będącym przedmiotem zainteresowania.
Jak zrobić D-Lucyferynę?
1. Przygotuj 200X roztwór podstawowy lucyferyny (30 mg/ml) w sterylnej wodzie. Delikatnie wymieszać przez odwracanie, aż lucyferyna całkowicie się rozpuści. Zużyć natychmiast lub podzielić na porcje i zamrozić w temperaturze -20°C do wykorzystania w przyszłości.
Jak wstrzykuje się lucyferynę?
(Lucyferyna jest zwykle podawana dootrzewnowo lub dożylnie.) Przykład: Wstrzyknąć 10 µLRoztwór podstawowy lucyferyny na gram masy ciała (normalnie ~200 µl dla myszy 20 g dla standardowego zastrzyku 150 mg/kg). 5. Odczekaj 10-20 minut przed obrazowaniem, aby uzyskać maksymalne plateau sygnału lucyferazy.