Przeciwciała kontrolne są ważnymi kontrolami, ponieważ wskazują na równe obciążenie próbek we wszystkich studzienkach. Kontrole ładowania wskazują również właściwy transfer białek na błonę podczas procesu western blotting. Kontrole ładowania to zazwyczaj białka o wysokiej i wszechobecnej ekspresji.
Co robi kontrola ładowania?
Kontrola ładowania to białko stosowane jako kontrola w eksperymencie Western blotting. …Są one używane do upewnienia się, że białko zostało równomiernie załadowane do wszystkich dołków.
Dlaczego używamy kontroli ładowania w Western blot?
Kontrola ładowania pełni drugą rolę jako kontrola w Western blot. Można ich użyć do sprawdzenia, czy nastąpiło równomierne przeniesienie z żelu na membranę przez cały żel. Jest to konieczne, gdy dokonuje się porównań poziomów ekspresji białka między próbkami.
Jak używać kontroli ładowania w Western blot?
Sygnały z kontroli ładowania są zwykle używane do normalizacji sygnałów z białek będących przedmiotem zainteresowania. Aby zastosować kontrolę obciążenia do tych celów, detekcję z kontrolnym przeciwciałem białkowym i przeciwciałem doświadczalnym należy przeprowadzić na tym samym blocie. Wiele różnych białek jest używanych jako kontrola ładowania.
Dlaczego aktyna jest używana jako kontrola ładowania?
Beta-aktyna, jest zwykle używana jako kontrola ładowania dla Western Blot toznormalizować poziomy wykrytego białka, potwierdzając, że obciążenie białka jest takie samo w żelu.
