Dane densytometryczne generowane dla Western blot są powszechnie używane do porównywania obfitości białek między próbkami. … Nieliniowe dane densytometryczne zaobserwowano, gdy wykryto Western blot przy użyciu fluorescencji w podczerwieni lub chemiluminescencji oraz w różnych warunkach SDS-PAGE.
Co to jest analiza densytometryczna?
Densytometria to ilościowy pomiar gęstości optycznej materiałów światłoczułych, takich jak papier fotograficzny lub klisza fotograficzna, pod wpływem ekspozycji na światło.
Jak używać densytometrii na obrazku J?
Densytometria przy użyciu ImageJ
- Kliknij środek kwadratu i przeciągnij go do następnego pasa. …
- Dla ostatniego pasa powtórz procedurę, ale naciśnij klawisze Ctrl i 3, aby ustawić ostatni pas. …
- Użyj narzędzia linii, aby narysować linie, aby wyeliminować tło pasa z obliczeń. …
- Idź do: Analiza→Żele→Oznacz szczyty, aby uzyskać raport.
Jak analizować wyniki Western blot?
Zweryfikuj swoje narzędzia do oznaczania ilościowego . Na przykład uruchom blotting, w którym ścieżki są obciążone 20 µg, 15 µg i 10 µg całkowitego białka. Po analizie względna ocena ilościowa pasm docelowych powinna wynosić 2, 1,5 i 1. Wypróbuj różne narzędzia i ustawienia do oznaczania ilościowego, aż będziesz mógł wiarygodnie odtworzyć prawidłowe wyniki.
Jak określić ilościowo Western blot?
Krok 1: Określ odjęcie tłagęstości białka będącego przedmiotem zainteresowania (PI) i kontroli normalizacyjnej (NC). Krok 2: Zidentyfikuj NC o najwyższej wartości gęstości. Krok 3: Podziel wszystkie wartości NC przez najwyższą wartość gęstości NC, aby uzyskać względną wartość NC.
