Jak dezaktywować trypsynę?

Spisu treści:

Jak dezaktywować trypsynę?
Jak dezaktywować trypsynę?
Anonim

Gdy komórki wydają się odłączone, dodaj 2 objętości wstępnie ogrzanej, pełnej pożywki wzrostowej, aby zdezaktywować trypsynę. Delikatnie rozprowadź pożywkę przez kilkukrotne pipetowanie powierzchni warstwy komórek, aby zapewnić odzyskanie >95% komórek.

Jak zatrzymać aktywność trypsyny?

Trawienie trypsyną można zatrzymać przez zamrożenie lub obniżenie pH reakcji poniżej pH 4 przez dodanie kwasu mrówkowego, octowego lub trifluorooctowego (trypsyna odzyska aktywność, gdy pH podnosi się powyżej pH 4). Wytrawione próbki można przechowywać w temperaturze -20°C.

Co neutralizuje trypsynę?

Bufor zawierający jony wapnia i magnezu również spowolni aktywność trypsyny. FBS jest jednak bardziej skutecznym sposobem hamowania aktywności trypsyny.

Czy surowica dezaktywuje trypsynę?

Surowica dezaktywuje resztki trypsyny, pozostałe po enzymatycznym trawieniu nerek i enzymach proteolitycznych, które są następnie syntetyzowane przez komórki. Świeżo trypsynizowane komórki można było hodować do pojedynczych warstw przy braku surowicy, pod warunkiem, że były wielokrotnie płukane w celu usunięcia pozostałości trypsyny.

Ile mediów potrzeba, aby dezaktywować trypsynę?

Dopóki używasz co najmniej stosunku 1:1 5-10% podłoża zawierającego surowicę z twoją trypsyną, hamowanie powinno być więcej niż wystarczające, po czym następuje odwirowanie i wymianę pożywki na świeże pożywkę.

Zalecana:

Interesujące artykuły
Jakie narzędzie odkręca śruby?
Czytaj więcej

Jakie narzędzie odkręca śruby?

Klucze służą do dokręcania i luzowania elementów złącznych, głównie nakrętek i śrub. Klucze są zazwyczaj wykonane z chromowanego stopu stali. Materiał sprawia, że klucze są trwałe i łatwe w czyszczeniu. Jakiego klucza najlepiej użyć do poluzowania śruby?

Gdzie jest góra dziadka?
Czytaj więcej

Gdzie jest góra dziadka?

Grandfather Mountain to góra, atrakcja non-profit i park stanowy Karolina Północna w pobliżu Linville w Karolinie Północnej. Na wysokości 5 946 stóp jest to najwyższy szczyt na wschodniej skarpie Gór Blue Ridge, jednego z głównych łańcuchów Appalachów.

Jak wyglądał wiek paleolitu?
Czytaj więcej

Jak wyglądał wiek paleolitu?

W epoce paleolitu homininy homininy Wczesny współczesny człowiek (EMH) lub anatomicznie współczesny człowiek (AMH) to terminy używane do odróżnienia Homo sapiens (jedyny istniejący gatunek hominina), który są anatomicznie zgodne z zakresem fenotypów obserwowanych u współczesnych ludzi z wymarłych archaicznych gatunków ludzkich.