Ponieważ ściana komórkowa jest tak odporna na większość związków, organizmy kwasoodporne wymagają specjalnej techniki barwienia. Podstawowy barwnik stosowany do barwienia kwasoodpornego, karbolfuksyna, jest rozpuszczalny w tłuszczach i zawiera fenol, który pomaga barwnikowi przenikać przez ścianę komórkową. Jest to dodatkowo wspomagane przez dodanie ciepła.
Dlaczego do barwienia kwasoodpornego potrzebne jest ciepło?
Podgrzewanie szkiełka pomaga zmiękczyć woskowy materiał na ścianie komórkowej bakterii. Woskowaty materiał jest hydrofobowy do roztworu wodnego, ale nie do fenolowego roztworu fuksyny zasadowej. Stąd silna fuksyna karbolowa jest w stanie zabarwić komórkę. Po zabarwieniu mają tendencję do odbarwiania się o 20% H2SO4 (kwas siarkowy).
Jak odbarwiasz kwasem?
Instrukcje szybkiego barwienia kwasem
- Suszyj na powietrzu i utrwal na gorąco cienką warstwę mikroorganizmów. …
- Zalej zjeżdżalnię karbolfuksyną. …
- Zalej kwaśnym alkoholem przez 30 sekund. …
- Odbarwij szkiełko, zalewając szkiełko błękitem metylenowym na 30 sekund. …
- Wysuszyć slajd, umieszczając go między kartkami książki Bibulous.
Czy barwienie metodą Grama wymaga ciepła?
Barwienie metodą Grama jest zwykle wykonywane na preparacie rozmazowym, który został utrwalony na gorąco. Jedną z funkcji mocowania jest zabezpieczenie (zamocowanie) komórek na szkiełku. Jednak w biofilmie komórki są już mocno przytwierdzone. Ponadto utrwalono ciepłoszkiełko jest suche, ale biofilm składa się głównie z wody.
Jaka plama nie wymaga ciepła?
Polega na nałożeniu barwnika podstawowego (fuksyna podstawowa), odbarwiacza (kwasowo-alkoholowy) i barwnika kontrastowego (błękit metylenowy). W przeciwieństwie do barwienia Ziehla-Neelsena (barwienie Z-N), metoda Kinyouna barwienia nie wymaga ogrzewania.