Jak odsalać białko?

Spisu treści:

Jak odsalać białko?
Jak odsalać białko?
Anonim

Możesz również odsolić próbkę przez ultrafiltrację do 1 dziesiątej poprzedniej objętości, która ponownie rozrzedzi się i powtórzy krok UF. Najlepszą metodą odsalania jest odsalanie przez filtrację żelową wobec 50 mM buforu, a następnie ultrafiltrację (klasyczną, nie odśrodkową).

Co to jest odsalanie w oczyszczaniu białek?

Odsalanie jest stosowane do usuwania soli z roztworów białek, fenolu lub niewłączonych nukleotydów z kwasów nukleinowych lub nadmiaru odczynników sieciujących lub znakujących ze sprzężonych białek.

Jak oczyszczasz białka?

Podczas oczyszczania białek masowych, powszechnym pierwszym krokiem do izolowania białek jest strącanie za pomocą siarczanu amonu (NH4) 2SO4. Odbywa się to poprzez dodawanie coraz większych ilości siarczanu amonu i zbieranie różnych frakcji wytrąconego białka. Następnie siarczan amonu można usunąć za pomocą dializy.

Jak buforować białka wymiany?

Wymiana buforu jest jednak przeprowadzana przez pierwsze zrównoważenie żywicy z kolumny z buforem, w którym powinna znaleźć się próbka. W obu przypadkach składniki buforu przenoszące próbkę do kolumna zostanie zastąpiona roztworem, którym kolumna została wstępnie zrównoważona.

Którą z poniższych technik chromatograficznych można zastosować do odsalania białek?

Jak wspomniano powyżej, filtracja żelowa może być skutecznie wykorzystana do białkaodsalanie i jest osiągane przez zrównoważenie kolumny do filtracji żelowej wodą. Jednak wymianę buforu przeprowadza się najpierw równoważąc żywicę kolumny z buforem docelowym.

Zalecana:

Interesujące artykuły
Jak usunąć kalectwo?
Czytaj więcej

Jak usunąć kalectwo?

Możesz użyć noża użytkowego lub szpachelki, przecinając uszczelnienie i odrywając je. W przypadku wielu warstw uszczelnienia najlepsze mogą być szczypce z wąskimi końcówkami. Istnieją również specjalistyczne narzędzia do usuwania spoiw, które są przeznaczone do czystego usuwania spoiw.

Kto wygra konklawe w 100?
Czytaj więcej

Kto wygra konklawe w 100?

Mistrz Skaikru, Octavia Blake, wygrała i zaprosiła pozostałe 12 klanów (Floukru wymarły po Ostatnim Konklawe) do dzielenia bunkra. Pod przywództwem Octavii wszystkie klany zostały połączone w jeden klan - Wonkru. Kogo Octavia zabija podczas konklawe?

Czy grobla giganta ciągnie się do Szkocji?
Czytaj więcej

Czy grobla giganta ciągnie się do Szkocji?

Finn przysiągł, że nie pozwoli szkockiemu olbrzymowi tak łatwo odlecieć i zareagował, burząc wielkie kawałki skały wulkanicznej, które leżały w pobliżu wybrzeża i ustawiając je pionowo, tworząc z nich filary, które utworzyły Grobla ciągnąca się od Irlandii do Szkocji.