Produkt trawienia restrykcyjnego można łatwo przechowywać w -20 C. W temperaturze 4 C byłoby dobrze, ale aby upewnić się, że nie ma żadnej aktywności ani aktywności gwiazd, jest zaleca się trzymanie go w temperaturze -20 C.
Jak przechowywać strawiony DNA?
Spróbuj przechowywać plasterek żelu w lodówce przez noc lub nawet stopić plasterek w buforze i zamrozić go w temperaturze -20°C lub -80°C. Degradacja DNA będzie przebiegać z taką samą szybkością i w tych samych warunkach, co rozpuszczalne DNA, dlatego w celu dłuższego przechowywania należy stosować niższą temperaturę.
Co to znaczy strawić plazmid?
Oczyszczony plazmidowy DNA jest trawiony 1 lub więcej enzymami restrykcyjnymi (RE) wybranymi tak, aby uzyskać wyraźny wzór prążków DNA, który można łatwo rozdzielić przez elektroforezę. … Zazwyczaj wybierane są enzymy restrykcyjne, które przecinają miejsce wielokrotnego klonowania (MCS) i dają wzór diagnostyczny składający się z 2-5 łatwych do rozdzielenia prążków.
Jak przechowywać zlinearyzowane plazmidy?
Jeśli martwisz się dalszymi skutkami TE, przechowuj DNA w wyższym stężeniu i rozcieńczaj w razie potrzeby lub użyj "niskiego TE", który wynosi 10 mM Tris / 0,1 mM EDTA. gdy DNA lub RNA są czyste, można je przechowywać w temperaturze -20C przez wiele miesięcy bez jakiejkolwiek degradacji.
Jak długo możesz przechowywać podsumowanie ograniczeń?
Pro-Tip W zależności od zastosowania i ilości DNA w reakcji, czas inkubacji może wynosić od 45 minut do nocy. W przypadku skrótów diagnostycznych 1-2 godziny jest często wystarczające. W przypadku trawienia z >1 µg DNA użytego do klonowania, zaleca się trawienie przez co najmniej 4 godziny.