Tak rzeczywiście, jeśli chloroform nie został prawidłowo usunięty z preparatu fagowego. Chloroform jest zwykle dodawany do etapu izolacji/oczyszczania faga, aby pozbyć się bakterii. …Chloroform nie jest niezbędnym krokiem i należy wziąć pod uwagę, że może on dezaktywować inne fagi obecne w bakterii.
Co robi chloroform z E coli?
Chloroform w tym kontekście szybko zabija bakterie. Możesz to udowodnić, miareczkując CFU przed i po wytrząsaniu z CHCl3. Pozyskanie nowego faga z zaindukowanych bakterii zajmuje trochę czasu (okres utajony od indukcji) i jest mało prawdopodobne w przypadku szybko zabitych bakterii.
Jaka jest rola chloroformu w izolacji bakteriofaga?
W przypadku fagów coli chloroform jest generalnie używany do zabicia wszelkich obecnych bakterii, a etap sterylizacji filtra jest czasami pomijany. Chloroform może inaktywować niektóre fagi i należy go stosować ostrożnie i z odpowiednią kontrolą. Azydek sodu może być również użyty w przypadku niektórych fagów.
Jakie jest zastosowanie chloroformu do przygotowania lizatu podczas izolacji fagów?
Chloroform jest dodawany na 15-20 minut w celu lizy komórek, uwalniając w ten sposób cząsteczki wirusa do pożywki.
Jak izolujesz bakteriofagi?
Izolacja bakteriofagów do terapii fagowej jest często przedstawiana jako dość proste ćwiczenie polegające na mieszaniu próbki zawierającej fagi z bakteriami gospodarza, po którym następuje proste usuwanie resztek bakteriiprzez filtrację i/lub odwirowanie następnego dnia [1, 2, 3].